农业环境科学学报

作者：池佳瑶,李泽慧,方汉卿,李木子,王彤,李嘉敏,常潍帆,霍乃蕊,常泓,赵思俊

单位：山西农业大学动物医学学院, 山西 晋中 030801,中国动物卫生与流行病学中心, 山东 青岛 266032,山西农业大学动物医学学院, 山西 晋中 030801,中国动物卫生与流行病学中心, 山东 青岛 266032,中国动物卫生与流行病学中心, 山东 青岛 266032,青岛市现代生物工程及动物疫病研究重点实验室, 山东 青岛 266032,中国动物卫生与流行病学中心, 山东 青岛 266032,青岛市现代生物工程及动物疫病研究重点实验室, 山东 青岛 266032,中国动物卫生与流行病学中心, 山东 青岛 266032,天津农学院动物医学学院, 天津 300384,山西农业大学动物医学学院, 山西 晋中 030801,中国动物卫生与流行病学中心, 山东 青岛 266032,山西农业大学动物医学学院, 山西 晋中 030801,中国动物卫生与流行病学中心, 山东 青岛 266032,山西农业大学动物医学学院, 山西 晋中 030801,山西农业大学食品科学与工程学院, 山西 晋中 030801,中国动物卫生与流行病学中心, 山东 青岛 266032,青岛市现代生物工程及动物疫病研究重点实验室, 山东 青岛 266032

关键词：氟喹诺酮,诺氟沙星单克隆抗体,间接竞争酶联免疫吸附试验,生猪养殖场污水,

基金：中国动物卫生与流行病学中心创新基金项目（2021221200）

为建立一种可用于污水中氟喹诺酮类药物（FQs）监测的间接竞争酶联免疫吸附（ic-ELISA）方法，为规范养殖业用药行为及环境监测提供技术支撑，本研究以牛血清白蛋白-诺氟沙星（Norfloxacin，NOR）免疫小鼠制备单克隆抗体，考察NOR抗体的FQs类特异性和对其余8种FQs的交叉反应性；采用矩阵法确定OVA-NOR的最佳包被浓度和单抗的最佳稀释度以及酶标二抗的最佳稀释度；通过加标试验考察FQs阴性污水样本ic-ELISA的基质效应和检测灵敏度。结果表明：试验筛选得到4株可稳定分泌NOR单克隆抗体的细胞株，分泌的单抗均为IgG1亚类，Kappa型；与磺胺类、四环素类、大环内酯类药物无反应性，其中2F11细胞株分泌的单抗与9种FQs交叉反应率为3.93%~139.14%，且对3种停用药物的IC50值最低，反应率最高。以2F11细胞株单克隆抗体建立ic-ELISA检测方法：确定污水样本离心除杂和微滤后需稀释5倍处理，OVA-NOR的最佳包被浓度为0.64 μg·mL-1，NOR单抗的添加浓度为1.20 μg·L-1，酶标二抗以1∶20 000稀释。加标试验结果表明，9种FQs药物在0.3~20 μg·L-1范围内线性关系良好，R2均大于0.997，方法检测限为0.9 μg·L-1，定量限为3 μg·L-1。加标回收试验结果显示，9种药物的平均回收率（60.6%~107.1%）大于液相色谱-串联质谱（UPLC-MS/MS）方法（22.0%~73.6%），批内、批间标准差分别为1.7%~11.2%、4.1%~12.9%，均低于UPLC-MS/MS方法。研究表明，以NOR单抗建立的ic-ELISA检测方法适用于养殖污水中9种FQs药物的灵敏检测，且对样本前处理要求不高，更加经济和方便。

来源：2026年第4期

《农业环境科学学报》期刊编辑部

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